Генная инженерия в создании вакцин от кишечных инфекций
Исследования штаммов, выделенных из кишечника человека, окружающей среды или полученных с помощью генетических приемов холерных вибрионов 01 серовара, которые не содержали гена холерного экзотоксина (ХТ), показало, что у 1/3 привитых ими перорально людей развивается диарея. J.В.Kaper и соавт., M.M.Levin и соавт. (1988, 1988а) с помощью рекомбинантной генноинженерной технологии получили вакцинный штамм холерного вибриона CVD HgR, синтезирующий субъединицу В холерного экзотоксина, который при пероральной иммунизации людей вызывал накопление антител в крови. Разрабатываются и другие рекомбинантные вакцины.
Согласно данным N.F.Pierce и соавт. (1984—1987), иммуногенность штаммов холерных вибрионов не связана с наличием в клетках А+ и В+ генов vet. Она обусловлена способностью штаммов адгезироваться к энтероцитам и приживаться в кишечнике. Тем не менее подвижность муциназы и токсина, вероятно, способствует адгезии штаммов вибрионов к энтероцитам. По данным P.A.M.Guinee и соавт. (1987), напряженный иммунитет к холерным вибрионам при пероральной иммунизации вызывают только вакцинные штаммы, имеющие в клетках А+ и В+ гены vet.
H.Fujisawa и соавт. (1987) в сравнительных опытах на мышатах-сосунках линии BALBC установили, что при пероральном введении живые холерные вибрионы вызывают более напряженный иммунитет, чем убитые нагреванием вибрионы. Очищение мышей от вибрионов после повторного заражения происходило быстрее у иммунизированных живыми вибрио нами животных, чем у иммунизированных убитыми вибрионами.
По наблюдениям N.F.Pierce и соавт. (1988), иммуноген-ность живых вакцин зависит в основном от свойства колонизировать кишечник. Вакцины, слабо приживающиеся в кишечнике, не иммуногенны.
Используя методы современной генетики, Джакоб (1988) ввел в авирулентный штамм сальмонеллы ген СТР-3, кодирующий синтез фрагмента СТР50—60 субъединицы В холерного экзотоксина. В гибридном штамме ген экспрессировался в виде гибрида с флагеллином. B.D.Forrest и соавт. (1989) получили гибридную холерную живую вакцину ЕХ 645 путем введения в авирулентный штамм S.typhi гена 21а, контролирующего синтез О-антигена холерного вибриона. При пероральном введении добровольцам эта вакцина вызывала иммунологическую перестройку, сопровождавшуюся накоплением в крови специфических антител.
По данным C.O.Tacket и соавт. (1990), вакцина вызывала у добровольцев образование иммунитета, обеспечивающего защиту только 25 % привитых, но авторы считают ее перспективной. Q.-I.Ma и соавт. (1990) с помощью рекомбинантной плазмиды рММ-СТВ, несущей ген субъединицы В холерного экзотоксина, получил штамм Ту 21а (рММ-СТВ), продуцирующий субъединицу В. На основе этого штамма они сконструировали вакцину, состоящую из клеток Ту 21а (рММ-СТВ) и убитых клеток вибрионов, которая обладала иммуногенностью.
